对刺梨未受精胚珠愈伤组织诱导的材料和方法

　　1．1材料。

　　供试材料取自贵州大学试验农场，品种为“5号”刺梨，取小孢子发育单核中后期的花蕾置于4℃冰箱中预处理3～9d，接种前用流水冲洗1～2rain，在无菌条件下将花蕾投入75％酒精浸泡30S，再用0．1％的升汞消毒10min，用无菌水冲洗3～4次，剥取胚珠接种在诱导愈伤组织的培养基上，每瓶25—30粒，重复3次。

　　1．2试验方法。

　　1．2．1材料的低温预处理采集的花蕾经0、3、6、9d的低温(4℃)预处理后，剥取未受精胚珠接种在以MS为基本培养基附加有6一BA1．0ms／L+NAA2．0ms／L的培养基上。

　　1．2．2基本培养基对。未受精胚珠愈伤组织诱导的影响将刺梨花蕾经低温(4℃)处理3d后，剥取未受精胚珠接种在均附加有6一BA1．0ms／L+NAA2．0ms／L的MS、1／2MS、B5培养基上进行暗培养。

　　1．2．3，6一BA和NAA对未受精胚珠愈伤组织诱导的影响剥取未受精胚珠接种在添加有6一BA(0．5、1．0、2．0mg／L)和NAA(0．5、1．0、2．0、3．0mg／L)的MS培养基中，以观察不同生长调节剂组合对未受精胚珠愈伤组织诱导的影响。

　　1．2．4附加物对未受精胚珠愈伤组织诱导的影响剥取未受精胚珠接种在分别添加有不同浓度的V(50、100、150mg／L)和AgNO3(50、100、150mg／L)的MS+6一BA1．0mg／L+NAA2．0mg／L培养基中，以观察附加物V和AgNO对未受精胚珠愈伤组织诱导的影响。

   1．3培养条件置于培养室进行培养。诱导阶段均为暗培养，暗培养1个月后转入光培养，光强为20001x，光照为16h／d，温度为(25±1)℃，基本培养基为MS，pH5．8，琼脂6．0L，蔗糖30L。